Seahorse线粒体功能（实时 ATP 速率）实验服务

Seahorse XFe24能量代谢分析仪是一种用于测量细胞能量代谢的仪器，以 24 孔板形式测量活细胞，可以通过 Mito Stress 测量细胞的实时 ATP 速率（ATP Rate）来评估细胞的线粒体功能。

Seahorse XF 技术使用无标记传感器检测这些分析物中的细胞外变化，以测定细胞呼吸率OCR、糖酵解ECAR和 ATP 产生。

OCR 和 ECAR 是线粒体呼吸和糖酵解以及 ATP 生成速率的关键指标，综合这些检测结果可在系统水平表征培养细胞和体外样品的细胞代谢功能。

图片上传

活细胞实时分析	实时检测底物、抑制剂和其他化合物的响应，通过加药口系统进行加药并自动混合。
直接测定能量代谢	用功能分析验证蛋白质/基因表达实验的结果。
免标记平台	无需染色、分析物提取或破坏性样品处理过程。
所需样品量极少细胞量	少至 10 × 10^3 个细胞/孔（因细胞类型而异）

君礼生物提供Seahorse细胞能量代谢分析实验服务，包括糖酵解ECAR、线粒体呼吸OCR、脂肪酸氧化压力FAO等一系列实验服务，详情可以致电联系我们具体询问。

Seahorse 实时 ATP 速率（ATP Rate）检测

ATP产生速率

实验原理

首先测量基础 OCR 和 ECAR。加入寡霉素导致线粒体 ATP 合成受到抑制从而引起 OCR 减少，使 mitoATP产生速率得以量化。

ECAR 数据结合检测液的缓冲系数可以计算总的质子流出速率 (PER)。用鱼藤酮和抗霉素 A 完全抑制线粒体呼吸能够计算线粒体相关的酸化，结合 PER 数据能够计算 glycoATP 产生速率。

哺乳动物细胞中，糖酵解和氧化磷酸化 (OXOHOS) 途径提供大部分的细胞 ATP。氧化磷酸化消耗 O2，驱动氧气消耗速率 (OCR)，

这两条途径都能导致检测液酸化。葡萄糖通过糖酵解转换成乳酸，每分子乳酸伴随着一个 H+ 流出，而 TCA 循环使 ETC/氧化磷酸

化产生 CO2，也会导致检测液酸化。这些反应的总和是细胞外酸化(ECAR) 变化的主要驱动因素。

Seahorse XF 技术同时测量 H+ 产生 (ECAR) 和 O2 消耗(OCR) 的流量。通过获得这些基础条件下和连续添加线粒体抑制剂

（寡霉素和鱼藤酮/抗霉素 A）后的数据，总的细胞 ATP 产生速率以及途径特异性的 mitoATP 和 glycoATP 产生速率能够被免标记

实时测量。将 OCR 和 ECAR 数据转换成 ATP 产生速率的一系列计算描述如下，在获取数据后使用 Seahorse XF 实时 ATP 速率测