一、实验简介‌

Western Blot是一种广泛应用于分子生物学和医学研究的蛋白质检测技术，通过特异性抗体识别目标蛋白，实现高灵敏度、高特异性的定性和定量分析。

也可作为确定同一种蛋白质在不同细胞或者同一种细胞不同条件下的相对含量的半定量方法。

二、实验原理

‌蛋白质变性分离‌：SDS使蛋白质线性化并带负电，通过SDS-PAGE电泳按分子量大小分离。‌

转膜固定‌：电转印将凝胶中的蛋白质转移到PVDF或NC膜上，保持抗原活性。‌

抗体识别‌：封闭非特异性位点（如用BSA或脱脂奶粉）；一抗特异性结合目标蛋白；酶标二抗结合一抗，放大信号（如HRP化学发光）。‌

信号检测‌：通过化学发光或显色反应可视化目标蛋白条带。

三、‌技术特点‌

‌高特异性‌：依赖抗体与靶蛋白的精确结合。‌

定量分析‌：通过条带灰度值比较，可评估蛋白表达水平。