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耐药/稳转株筛选
一、实验简介1.耐药细胞株筛选通过长期低剂量药物暴露,诱导细胞产生适应性耐药性。细胞在药物压力下激活耐药机制(如P-糖蛋白表达),逐步提高药物浓度筛选耐药亚群。典型步骤:- 测定亲代细胞IC50值,以1/10-1/5 IC50为起始浓度处理细胞。- 逐步递增药物浓度,筛选耐受性增强的细胞群体。2.稳...
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流式细胞术
一、实验简介流式细胞术是一种基于激光散射和荧光的单细胞分析技术,可快速检测细胞的物理/化学特性(如大小、颗粒度、蛋白表达等),并实现细胞分选(FACS)13。广泛应用于免疫学、肿瘤学、干细胞研究等领域。二、 实验原理流式细胞仪使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微粒逐个通过样品池,同时由荧光探测器...
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细胞免疫荧光实验(IF)
一、实验简介细胞免疫荧光(Immunofluorescence, IF)是一种利用荧光标记抗体特异性结合靶蛋白的技术,通过荧光显微镜观察抗原的定位和表达水平。广泛应用于细胞生物学、病理学及药物研发等领域,可检测细胞内/膜蛋白、病原体及信号分子等。二、实验流程1. 样本制备细胞爬片:将细胞接种...
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细胞成球(3D细胞培养)
一、实验简介3D细胞培养是一种模拟体内细胞生长环境的体外培养技术,通过三维支架或无支架体系(如水凝胶、Matrigel等)支持细胞在立体空间中增殖、迁移和分化。与传统2D培养相比,3D培养能更真实地反映细胞间相互作用及组织微环境,广泛应用于疾病模型构建、药物筛选和组织工程等领域。二、实验原理细胞在三...
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内皮细胞成管
一、实验简介内皮成管实验是一种体外模拟血管生成的实验方法,主要用于研究内皮细胞(如HUVEC)在特定条件下形成管状结构的能力。该实验广泛应用于血管生物学、肿瘤血管生成研究及药物筛选领域。二、实验原理内皮细胞在基质胶(如Matrigel)上可响应血管生成因子(VEGF、bFGF等),通过迁移、增殖和自...
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细胞凋亡
一、实验简介细胞凋亡是细胞在基因调控下主动进行的程序性死亡过程,具有独特的形态学和生化特征(如细胞皱缩、染色质凝聚、DNA片段化等)。与坏死(Necrosis)不同,凋亡不引发炎症反应,对维持组织稳态至关重要。检测细胞凋亡的常用方法包括:Annexin V/PI双染法、Caspase活性检测、TU...
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