核心调控基因为:
▶正向:CASP1、 CASP11、GSDMD;
▶负向:CASP1、CASP11、GSDMD。
释放损伤相关分子:HMGB1、ATP、IL-1β、 IL-18。
免疫特征:促炎。
一、细胞焦亡的检测
1.电镜观察细胞形态:在细胞质膜破裂前,焦亡的细胞形成大量小泡,即焦亡小体。之后细胞膜上会形成孔隙,细胞膜破裂,内容物流出。
2.免疫荧光染色、免疫组化、Western等方法检测Gasdermin D(GSDMD)的切割。
▲荧光染色后焦亡细胞形态
3.q-PCR、Western Blot、免疫组化等方法检测炎性小体(如NLRP3、 ASC)和Caspase(主要是Caspase-l,Caspase-4,Caspase-5, Caspase-11)的激活。
4.Western Blot和ELISA等方法检测IL-1β和IL-18前体的切割成熟和释放。
▲细胞焦亡WB图
5.Tunel检测细胞死亡形态。
6.CCK8法测定细胞活力。
二、细胞焦亡相关检测&产品
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